| 更新時(shí)間： | 2021-02-04 |
| 訪(fǎng)問(wèn)量： | 2257 |
| 廠(chǎng)商性質(zhì)： | 生產(chǎn)廠(chǎng)家 |
提供商: 上海研謹生物服務(wù)名稱(chēng): 明膠酶譜MMP（2/9）檢測實(shí)驗規格: 實(shí)驗服務(wù)價(jià)格： 200元周期： 10天左右 收費標準/服務(wù)周期/提供結果:歡迎咨詢(xún)詳談，我們會(huì )根據您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。更多實(shí)驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內容,或來(lái)電詳詢(xún)!
明膠酶譜MMP（2/9）檢測實(shí)驗
酶譜法(Zymography) 基于SDS- PAGE電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法檢測MMP-2、MMP-9活性，靈敏度可達10pg，高于ELISA 方法。
基本原理和程序是:以加有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠分離含蛋白酶的樣品，電泳結束后取出凝膠與酶反應Bufer孵育,凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮區域，能同時(shí)指示MMP-2、MMP-9的位置(酶譜)，可檢測樣本有血液、滲出液、細胞提取物等。
服務(wù)周期: 10工作日
結果提供:結果報告、代表性圖片，操作流程及相關(guān)試劑儀器信息。
明膠酶譜MMP（2/9）檢測實(shí)驗樣本提供需知:
1)客戶(hù)告知實(shí)驗分組、編號及背景設計資料，具體要求請事先說(shuō)明;
2)標本收集、保存與運送:
①組織樣品:新鮮組織放入液氮或-70 度保存,組織不少于100mg;
②培養細胞:通過(guò)細胞計數取不少于2x106個(gè)細胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水，混勻后保存于冰箱(-70°C，避免反復凍融) ;
③血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水，保存(-70°C可長(cháng)期保存，避免反復凍融)
④血清或細胞培養液標本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管,保存(49C可保存15-20 天, -70°C可長(cháng)期保存，避免反復凍融)
4)樣本運輸:
①組織樣本、細胞樣本以干冰運輸;
②細胞樣本也可直接寄送培養瓶(密封保證不污染、培養液不漏出) ;
③血清或上清液直接加冰袋寄(送視路程遠近2 3天可到達)。
客戶(hù)須知:
檢測系統含陽(yáng)性參照或內參，報價(jià)含蛋白提取
實(shí)驗注意事項：
1.制備聚丙烯酰胺時(shí)應注意排除氣泡 。
2.明膠酶譜的活性受鈣離子，鋅離子，和PH值等因素的影響，因此緩沖液 配制應嚴格準確，盡量用超純水，孵育溫度也掌握好。
3.用大梳子
4.孵育液的PH在7.5-7.6，復性的TRITON時(shí)間長(cháng)了會(huì )有絮狀物，所以實(shí)驗時(shí)盡量使用新鮮配置的。
5.孵育的37度不要在CO2培養箱中，因為會(huì )改變孵育液的PH值，在普通孵箱即可。
6.明膠要4度保存，配好后1周內使用
實(shí)驗代做服務(wù)：
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